[1]张晨瑶,刘敏,王飞,等. 利用分离型内含肽DnaE 表达抗菌肽[J].湖北大学学报(自然科学版),2017,(04):354.
 [J].,2017,(04):354.
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 利用分离型内含肽DnaE 表达抗菌肽()
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《湖北大学学报(自然科学版)》[ISSN:1000-2375/CN:42-1212/N]

卷:
期数:
2017年04期
页码:
354
栏目:
出版日期:
2017-07-05

文章信息/Info

作者:
 张晨瑶刘敏王飞孙斌马立新余晓岚
 (生物资源绿色转化湖北省协同创新中心,湖北大学,生命科学学院,湖北武汉430062)
关键词:
 关键词:抗菌肽Npu DnaESsp DnaE反式剪接抑菌活性
文献标志码:
A
摘要:
 摘要:拟验证天然断裂内含肽Npu DnaE、Ssp DnaE 的反式剪接反应对嵌合蛋白形成的影响,探讨依据此方法表达抗
菌肽的可行性,规避抗菌生物表达中对宿主的毒害作用. 将花蝉属抗菌肽ADP?1(Amblyomma defensin peptide 1)拆分为N
端和C 端两部分,其N 端与断裂型内含肽Npu DnaE 的N 端融合,C 端与Ssp DnaE 的C 端融合,并分别构建到原核表达
载体pET?23a(Amp + )和pET?30a(Kan + )上,获得重组表达质粒pET?23a?ADP?1?N?Npu 和pET?30a?Ssp?ADP?1?C,然后单
独或共转化大肠杆菌感受态细胞BL21. 实验结果表明,两个重组质粒分别单独或组合转化至Bl21(DE3),经IPTG 诱导
后,SDS?PAGE 检测转化的菌株中都表达了目的蛋白,共转化的菌株诱导表达破菌后其上清液有抑菌活性. 该实验验证以
两种天然断裂型内含肽Ssp DnaE 和Npu DnaE 及搭载的ADP?1 N 端和C 端可在大肠杆菌中获得表达,且共转化的两段
内含肽可在离体上清中发生反式剪接,促进融合在内含肽上的ADP?1 两部分形成完整具有抑菌活性产物.
更新日期/Last Update: 2017-07-06